|
Productdetails:
|
| Productnaam: | DNA-ligase | 10299ES40: | U 40.000 |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | U 400.000 | 10299ES83: | U 1.600.000 |
| De mol van inputdna (pmol): | Inputdna (ng)/[0,66 × gemiddelde lengte van Inputdna (bp)] | Toepassing: | voor onderzoek SLECHTS gebruik! |
| Hoog licht: | 400 Ligase van DNA van U/UL T4,Ligase van onderzoekt4 DNA,T4 DNA-Ligase Biochemische Reagens |
||
Snelle T4-ligase van DNA (400 U/ΜL)
Snelle T4-Ligase van DNA is één enkel enzymproduct dat kan worden gebruikt om de fragmenten en de adapter van DNA tijdens NGS-bibliotheekbouw aan te sluiten. Het product is geverifieerd door hoge productie te rangschikken en gehad uitstekende kwaliteit. Dit enzym heeft een hoogst efficiënte het afbinden capaciteit, die voor het afbinden van complexe nucleic zuurfragmenten, zoals de adapter Ω van het MGI-platform zeer geschikt is. Het wordt geadviseerd om de Afbindingsmodule van DNA van Hieff te selecteren NGSTM Ultima (Cat#12604) de waarvan kerncomponent Snelle T4-Ligase van DNA voor klanten is die systeem geen aanpassing nodig hebben.
| Productnaam | Cat# | Grootte |
| Snelle T4-Ligase van DNA (400 U/ΜL) | 10299ES40 | U 40.000 |
| 10299ES42 | U 400.000 | |
| 10299ES83 |
U 1.600.000 |
Productomschrijving over Snelle T4-ligase van DNA
Snelle T4-Ligase van DNA is één enkel enzymproduct dat kan worden gebruikt om de fragmenten en de adapter van DNA tijdens NGS-bibliotheekbouw aan te sluiten. Het product is geverifieerd door hoge productie te rangschikken en gehad uitstekende kwaliteit. Dit enzym heeft een hoogst efficiënte het afbinden capaciteit, die voor het afbinden van complexe nucleic zuurfragmenten, zoals de adapter Ω van het MGI-platform zeer geschikt is. Het wordt geadviseerd om Hieff NGS te selecterenTMDe Afbindingsmodule van Ultimadna (Cat#12604) de waarvan kerncomponent Snelle T4-Ligase van DNA voor klanten is die systeem geen aanpassing nodig hebben.
Productonderdelen van Snelle T4-ligase van DNA
| Componentenaantal | Componenten | Cat#/Size | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
| 10299-a | Snelle T4-Ligase van DNA (400 U/ΜL) | 100 µL | 1 ml | 4 ml |
| 10299-B | 10 Ligase van DNA van × T4 Buffer | 250 μL | 5 × 500 μL | 10 ml |
Instructies
1. De huidige de bibliotheekbouwdozen worden van heersende stromingsdna over het algemeen niet gezuiverd na eindreparatie en a-De steel verwijderende van behandeling, en uitvoeren direct adapterafbinding. Gelieve te verwijzen naar de volgende voorbereiding voor het reactiesysteem. De draaikolk grondig, rotatie kort en broedt voor 15 min uit bij 20°C.
| Componenten | Volume (μL) |
| DA-de steel verwijderde van DNA | 60 |
| 10 Ligase van DNA van × T4 Buffer | 10 |
| 50% PIN 6000 | 10* |
| DNA-Adapter | X** |
| Snelle T4-Ligase van DNA (400 U/ΜL) | 15*** |
| ddH2O | Tot 100 |
[Nota]: *50% PIN 6000 wordt niet verstrekt in de uitrusting, moet u het door zich voorbereiden.
** Verwijs naar de volgende lijst voor de hoeveelheid adapter.
*** De hoeveelheid Snelle T4-gebruikt Ligase van DNA kan 1-5 μL worden toegevoegd zoals nodig.
2. De kwaliteit en de concentratie van direct gebruikte adapters beïnvloeden afbindingsefficiency en bibliotheekopbrengst. Teveel adaptergebruik kan meer adapterdimeer produceren, terwijl het lagere gebruik afbindingsefficiency en bibliotheekopbrengst kan beïnvloeden. De volgende lijst maakt een lijst van de geadviseerde die hoeveelheid adapter in de verschillende situaties van Inputdna gebruikend wordt gebruikt deze uitrusting.
| Inputdna |
Adapter: Inputdna (maalverhouding) |
Inputdna |
Adapter: Inputdna (maalverhouding) |
| 1 μg | 10:1 | 50 ng | 100:1 |
| 500 ng | 20:1 | 25 ng | 200:1 |
| 250 ng | 40:1 | 1 ng | 200:1 |
| 100 ng | 100:1 | pg 500 | 400:1 |
[Nota]: DNA van de de mol (pmol) Input ≈ van inputdna (ng)/[0,66 × gemiddelde lengte van Inputdna (bp)].
Stap 1: Bereken het aantal mollen inputdna. Formule: DNA van de de mol (pmol) Input ≈ van inputdna (ng)/[0,66 × gemiddelde lengte van Inputdna (bp)]; De mol van inputdna (pmol) =100 ÷ (0.66×300) = 0,5 pmol;
Stap 2: Volgens de bovengenoemde lijst, bereken het toegevoegde aantal mollen van adapter.; Wanneer Inputdna 100ng is, de maalverhouding van adapters: inputdna is 100:1, en het aantal mollen van adaptersadded=100×0.5 pmol=50 pmol;
Stap 3: Bereken het volume van de adaptertoevoeging. De adapterconcentratie = 15 μmol/L (als u de adapter gebruikt van ander bedrijf, u moet zijn concentratie volgens zijn instructies) bepalen; Het volume van adapter voegde = mollen van adapter toegevoegde (pmol 50) concentratie ÷ van adapter (15 μmol/L) = 3,34 μL toe (Nota: 15 μmol/L = 15 pmol/μL);
Samengevat, het volume waaraan de adapter kan worden toegevoegd is 3,4 μL. (Nota: Het maximumtoevoegingsvolume van de adapter overschrijdt geen 5 μL).
Het product wordt verscheept met ijspakken en kan bij -20°C twee jaar worden opgeslagen.
Eenheidsdefinitie
In een 20 μL systeem van de afbindingsreactie, wanneer 6 μg van λDNA-achtersteⅢ bij 16℃ voor 30 die mins worden gereageerd, werd de hoeveelheid enzym wordt vereist om te geven meer dan 50% afbinding van de DNA-fragmenten gedefinieerd als één eenheid (u).
Voorzichtigheid
1. T4 DNA-is Ligase gevoelig voor fysieke denaturatie. Wanneer zich het mengen, keer goed zacht de buis en de schok om. Schud niet krachtig;
2. De enzymen zouden in een ijsdoos of op een ijsbad moeten worden opgeslagen wanneer gebruikt, en zouden bij -20°C onmiddellijk na gebruik moeten worden opgeslagen;
3. Dit product is voor onderzoek SLECHTS gebruik!
4. Voor uw veiligheid en gezondheid, te dragen gelieve laboratoriumlagen en beschikbare handschoenen voor verrichting.
Als u meer informatie over dit Snelle T4-ligase van DNA (400 U/ΜL) nodig hebt, gelieve met ons te contacteren, dank u
Contactpersoon: Ms Kris
Tel.: +8613049739311
